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技術(shù)文章

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造血干細(xì)胞培養(yǎng)基介紹造血干細(xì)胞培養(yǎng)基具有光明的臨床治療前景。然而，常用培養(yǎng)基含有胎牛血清（FBS），增加了病原體、異種抗原、批間不穩(wěn)定性。美國(guó)FDA正考慮禁止使用FBS于細(xì)胞治療。為此，StemRD成功研制了MessenGro?，一種無(wú)血清、無(wú)異種蛋白、化學(xué)成分明確的人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基。造血干細(xì)胞培養(yǎng)基化學(xué)成分明確，設(shè)計(jì)用于人體骨髓、臍帶血和脂肪組織等間充質(zhì)干細(xì)胞的大程度擴(kuò)增。MesenGro?化學(xué)成分明確是由于它的成分既沒(méi)有化學(xué)合成，也沒(méi)有重組體生產(chǎn)。造血干細(xì)胞培養(yǎng)基直接來(lái)源于非人體動(dòng)物細(xì)胞...

2019 3-11
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是“慢凍快融”，這樣可以大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多用二甲基亞砜（DMSO）作為保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性；緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的物理?yè)p傷。復(fù)蘇細(xì)胞采用快速融化的方法可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存操作要點(diǎn)：1、細(xì)胞凍存前12~24h，換新鮮培養(yǎng)基，使細(xì)胞一直處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。2、待細(xì)胞長(zhǎng)至80%匯合...

2019 3-7
細(xì)胞凍存操作步驟操作步驟（一）細(xì)胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。3.去除PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)；4.離心1000rpm，5min；5.去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的終密度為5×106/ml～1×107/ml；6.將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5ml；7.在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作...

2019 3-4
PALL血清替代品供應(yīng)商告訴你如何解凍血清從字面上我們不難看出PALL血清替代品是什么，PALL血清替代品就是一種代替血清的一款藥劑。那什么是血清呢？血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿，如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損？將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。避免產(chǎn)生沉淀物1、解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-...

2019 2-20
細(xì)胞適應(yīng)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的方法眾所皆知干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的基本配方:基本成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)，多數(shù)呈貼壁生長(zhǎng)或兼性貼壁生長(zhǎng)；而當(dāng)其在無(wú)血清、無(wú)蛋白培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)，由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白，細(xì)胞往往以懸浮形式生長(zhǎng)。1.直接適應(yīng)——細(xì)胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（SFM）中。一些類型細(xì)胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應(yīng)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基。對(duì)于直接適應(yīng)，接種細(xì)胞密度應(yīng)該:2.5×10~3.5×...

2019 1-16
蛋白負(fù)染色試劑盒優(yōu)缺比一比優(yōu)缺比一比：1.蛋白負(fù)染色試劑盒缺點(diǎn)：需搭配黑底容器以便觀察優(yōu)點(diǎn)：(1)特殊原理：負(fù)染原理，染劑只染膠體，不結(jié)合蛋白(2)快速染色：染色過(guò)程只需5分鐘，不需要醋酸固定(3)高靈敏度：超高染色靈敏度(4)實(shí)驗(yàn)相容：染色過(guò)后可進(jìn)行蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)漬或、電泳溶離、質(zhì)譜儀蛋白質(zhì)鑒定與轉(zhuǎn)譯后修飾分析。(5)安全可靠：染液不具毒性且可室溫儲(chǔ)存(6)方便觀察：肉眼可見(jiàn)影像，不須熒光2.SYPRORuby優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高缺點(diǎn)：(1)操作過(guò)程需要全程避光(2)須長(zhǎng)時(shí)間過(guò)夜染色(3)操作過(guò)程需搭配有機(jī)溶劑...

2019 1-16
低速離心機(jī)使用注意事項(xiàng)低速離心機(jī)使用注意事項(xiàng)1.低速離心機(jī)轉(zhuǎn)頭應(yīng)固定在準(zhǔn)確位置，固定螺絲應(yīng)擰緊，轉(zhuǎn)頭等配件是否有裂縫及腐蝕，地線接觸情況。2.低速離心機(jī)必須使用獨(dú)立的插座，保證電壓穩(wěn)定；如用戶電壓不穩(wěn)定，必須連接穩(wěn)壓電源，以免損壞離心機(jī)；臺(tái)式低速離心機(jī)要放在結(jié)實(shí)、穩(wěn)固、水平的臺(tái)面上，機(jī)箱周圍留有一定空間，保持通風(fēng)良好。3.低速離心機(jī)每次使用完后，應(yīng)打開(kāi)蓋子，擦去冷凝水，然后自然晾干；離心前后，轉(zhuǎn)頭必須輕輕垂直放下或提起，避免碰撞轉(zhuǎn)軸和轉(zhuǎn)頭。4.離心機(jī)轉(zhuǎn)頭，吊籃，套管等，使用完畢后，應(yīng)擦干，并分別放...

2019 1-14
你知道干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點(diǎn)么？干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基和試劑被廣泛的應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動(dòng)物和無(wú)脊動(dòng)物細(xì)胞以制備單克隆抗體，病毒抗原和重組蛋白等。大多數(shù)的無(wú)血清產(chǎn)品含有向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)離子的轉(zhuǎn)鐵蛋白和調(diào)節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素，以及一些蛋白質(zhì)如清蛋白，纖連蛋白，胎球蛋白等，這些蛋白在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同功能，如吸附毒性化合物，抗生物反應(yīng)器剪切力，提供細(xì)胞貼壁所需的基質(zhì)，作為脂類和其他生長(zhǎng)因子的載體等。在我們使用干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基中也是分為優(yōu)缺點(diǎn)的，下面小編就給大家講一講吧干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)1.可避免血清批次間的質(zhì)量...

2019 1-7

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