人PBMC中免疫細(xì)胞分類

    人外周血作為免疫系統(tǒng)來研究時(shí)，通常需要通過密度梯度離心去除紅細(xì)胞。zui常用的是利用Ficoll Paque將全血分成高于和低于1.077g/ml兩種密度的組分。
    外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)密度較小，位于Ficoll上層，也稱為buffy coat。紅細(xì)胞和包括中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞在內(nèi)的多形核細(xì)胞(PMNs)密度大于1.077g/ml可被除去。嗜堿性粒細(xì)胞的密度在1.077g /ml左右，部分仍然存在于PBMC組分中。
    PBMCs 包括淋巴細(xì)胞(T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞)、單核細(xì)胞和DC細(xì)胞。在人類中，這些細(xì)胞群的比例在個(gè)體中有所差異。通常PBMCs中，淋巴細(xì)胞占70 – 90%，單核細(xì)胞占10 – 30%，而DC細(xì)胞則只占1 -2%。在淋巴細(xì)胞中，CD3+ T細(xì)胞占70 – 85%(在PBMCs中占45 – 70%)，B細(xì)胞占5 – 20%(在PBMC中zui多15%)，NK細(xì)胞占5 – 20%(在PBMC中zui多15%)。
    CD3+ T細(xì)胞由CD4+ T細(xì)胞(在PBMCs中占25 – 60%)和CD8+ T細(xì)胞(在PBMCs中占5 – 30%)組成，兩者比例在2：1左右。CD4+ T細(xì)胞和CD8+ T細(xì)胞可進(jìn)一步分為幼稚細(xì)胞、抗原接觸的中樞記憶細(xì)胞、效應(yīng)記憶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞亞群。
    CD4+ T細(xì)胞為輔助性T細(xì)胞，根據(jù)特異性細(xì)胞因子、表面分子或轉(zhuǎn)錄因子可進(jìn)一步分為各種功能亞群，包括調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、Th1、Th2、Th17、Th9、Tfh 和Tr1等亞型。而近年來發(fā)現(xiàn)CD8+ 細(xì)胞毒性T細(xì)胞的表型和功能差異非常大，也許有200種功能表型，因此對其的研究會(huì)非常復(fù)雜。
    在外周血中，B細(xì)胞分為過渡期、幼稚、記憶亞群以及漿細(xì)胞。DC細(xì)胞包括漿細(xì)胞樣DC細(xì)胞(pDC)和髓系衍生的DC細(xì)胞(mDC)。單核細(xì)胞可分為經(jīng)典單核細(xì)胞和非經(jīng)典CD16+促炎性單核細(xì)胞，后者在單核細(xì)胞中zui多占10%，具有*的功能。
    人類免疫系統(tǒng)的研究著重于對PBMCs的表型和功能研究。為了通過PBMCs研究人的免疫系統(tǒng)，了解外周血中存在的細(xì)胞種類，以及其如何在組織中分化和發(fā)揮功能是很重要的。zui后，熟悉細(xì)胞表面和胞內(nèi)表型鑒定、以及的檢測方法也是非常關(guān)鍵的。