HES分離紅細(xì)胞

HES分離紅細(xì)胞

    HES是從支鏈淀粉衍生出來的，是富含淀粉的復(fù)合物，其生理和化學(xué)特性主要由取代級、平均分子量決定。大量實(shí)驗(yàn)表明平均分子量越大對紅細(xì)胞的凝集作用越強(qiáng)，有效提高血細(xì)胞的沉降速度，從而使血細(xì)胞與其它細(xì)胞分離。故而，使用HES沉淀法是一種的細(xì)胞分離方法。

    間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells ,MSCs) 是指一群可向成骨細(xì)胞、成脂、肪胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、肝臟細(xì)胞、心肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞分化的多潛能組織干細(xì)胞,是在細(xì)胞治療、基因治療中有效發(fā)揮作用的理想工程細(xì)胞。 MSCs不僅存在于骨髓,也可從臍血、外周血中以及脂肪組織、肌肉、胎兒器官、大腦、牙齒中分離。UCB - MSCs的分離、篩選、增殖、分化與臍血樣本的選擇、培養(yǎng)基的差異以及分離、擴(kuò)增分化過程中操作技術(shù)等多種因素有關(guān)。目前用于UCB - MSCs分離的方法有:貼壁篩選法、密度梯度離心法、流式細(xì)胞儀法和免疫磁珠法。流式細(xì)胞儀法對細(xì)胞損傷較大，免疫磁珠法價(jià)格相對較貴且由于抗原抗體反應(yīng)也容易改變細(xì)胞原有特性，而HES聯(lián)合密度梯度離心法常與貼壁篩選法結(jié)合使用,可提高所得UCB - MSCs的純度，目前研究多采用此法。國內(nèi)不少學(xué)者采用HES沉淀紅細(xì)胞，然后再進(jìn)行離心分離單個(gè)核細(xì)胞，也取得不錯(cuò)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)證明采用隨機(jī)數(shù)字表法，將每份臍血隨機(jī)分入兩個(gè)不同處理組，從而將臍血樣本的個(gè)體差異減小到zui小程度。結(jié)果證實(shí)，HES聯(lián)合密度梯度離心法獲得的有核細(xì)胞數(shù)量明顯多于FICOLL密度梯度離心法。

    HES分子處在紅細(xì)胞之間聯(lián)接而成,同時(shí)還阻礙白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，并使平均血小板容積呈現(xiàn)微弱地降低，從而有輕度抑制血小板集聚的功能。臍血經(jīng)HES處理后，可使紅細(xì)胞沉積至試管底，對其它主要成分包括單個(gè)核細(xì)胞無影響。經(jīng)這樣處理后，實(shí)驗(yàn)時(shí)間相對較短，步驟相對較少，細(xì)胞污染幾率小，從而使細(xì)胞數(shù)損失較少。結(jié)論證明，與相應(yīng)的干細(xì)胞分離液聯(lián)合分離使用HES沉淀法是一種的臍血單個(gè)核細(xì)胞分離方法。